路易企业竭诚为广大用户提供优质的服务

安捷伦 Seahorse XF T细胞代谢分析试剂盒

首页 ꄲ 安捷伦 Seahorse XF T细胞代谢分析试剂盒

细胞介导免疫疗法的发展已彻底改变了癌症研究和免疫系统研究，一种很有前景的细胞疗法涉及靶向癌细胞的新型嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞的基因工程改造，有充分证据表明，T 细胞的代谢特性，即 T 细胞如何维持生物能量代谢需求，在调节其抗肿瘤功能和决定 T 细胞免疫疗法的有效性中发挥重要作用。安捷伦 Seahorse XF T 细胞代谢分析试剂盒是一款能实时全面评估 T 细胞代谢的强大解决方案，实现 T 细胞群糖酵解和线粒体活性的生物能量代谢的可靠检测，这些检测结果可能有助于提高 T 细胞治疗产品的抗肿瘤功能，对于旨在改善 T 细胞持久性或避免出现活化后代谢耗竭的治疗产品开发，这些检测尤其有价值。

Seahorse XF T 细胞代谢分析试剂盒

实验简介：

Seahorse XF T 细胞代谢分析试剂盒中使用了解偶联剂 BAM15，使您能够获得关于 T 细胞最大呼吸能力的更准确的检测结果。与其他质子载体解偶联剂（如 FCCP）相比， BAM15 的细胞毒性更低，尤其适用于敏感细胞类型（如初始 T 细胞）。 BAM15 可以在更宽的浓度范围内诱导最大呼吸，从而大大地减少了进行解偶联剂优化的需要，这一点也优于FCCP。该试剂盒可应用于以下两个检测工作流程：

1. XF T 细胞持久性检测

安捷伦 Seahorse XF T 细胞持久性检测专为评估 T 细胞产品（如 CAR-T）在输注后产生持久性免疫应答，并生成记忆样 T 细胞的能力而开发。一些文章中指出，具有高氧化基础代谢表型（mitoATP/ glycoATP 生成速率）和高备用呼吸能力 (SRC) 的 T 细胞在过继转移后具有更出色的持久性。这项检测可用于评估不同的构造子设计、工程改造策略、起始材料的选择或生产扩增过程中的代谢调节，以促进与持久性 T 细胞相关的代谢表型。典型的检测图和数据输出如下图：

安捷伦 Seahorse XF T 细胞持久性检测

2. XF T 细胞适应性检测

安捷伦 Seahorse XF T 细胞适应性检测旨在用于评估在营养条件发生改变或存在限制的情况下，T 细胞是否能够满足代谢需求。通过这种方式可评估 T 细胞在肿瘤微环境中维持代谢适应性的能力。通过以下方法可以创造营养受限的条件：使用底物通路抑制剂（如 Etomoxir、 UK5099、 BPTES）、用其他碳源替代葡萄糖或直接改变检测液中代谢底物的含量水平。这项检测可报告线粒体呼吸和糖酵解的基础 ATP 生成速率以及最大呼吸能力。典型的检测图和数据输出如下图：

安捷伦 Seahorse XF T 细胞适应性检测

词汇表：

mitoATP 生成速率：与线粒体中氧化磷酸化相关的 ATP 生成速率（以 pmol/min 表示）。

glycoATP 生成速率：与糖酵解通路中葡萄糖转化为乳酸相关的 ATP 生成速率（以 pmol/min 表示）。

totalATP 生成速率：特定检测条件下，活细胞中线粒体和糖酵解 ATP 生成速率的总和。这个参数代表检测条件下细胞的能量要求或需求。

糖酵解 ATP 百分比（基础）：glycoATP 与 totalATP 的比值。

备用呼吸能力：最大OCR信号（加入解偶联剂后获得的信号）和基础 OCR 信号之间的差值。这一检测结果可反映细胞在能量需求增加时的响应潜力（能力），以及细胞呼吸与理论最大呼吸间的差距。这个参数可作为细胞适应性或灵活性的指标。

备用呼吸能力 (%)：最大呼吸（加入解偶联剂后获得的信号和加入鱼藤酮及抗霉素 A (Rot/AA) 后获得的信号的差值）与基础呼吸（基础 OCR 信号和加入 Rot/AA 后获得的信号的差值）之间的比值。

最大呼吸：最大 OCR 信号（加入解偶联剂后获得的信号）和加入 Rot/AA 后的 OCR 信号之间的差值。解偶联剂通过刺激呼吸链在最大能力下工作来模拟一种生理上的 “能量需求”，这会引起底物（糖、脂肪和氨基酸）的快速氧化，以应对这一代谢挑战。它表明了细胞能够实现的最大呼吸速率。

T 细胞在活化和分化为效应细胞和记忆细胞的过程中会发生一系列的代谢表型变化，这些变化对维持 T 细胞的功能至关重要。全新安捷伦 Seahorse XF T 细胞代谢分析试剂盒，使用了一种改进的解偶联剂 (BAM15)，能够使 T 细胞生物能量代谢能力的测量结果更一致、更准确，该试剂盒旨在对 T 细胞群的糖酵解和线粒体活性，以及线粒体呼吸能力进行同步可靠测量。这些测量通过单次检测提供了 T 细胞代谢特性的完整表征，且可与 T 细胞治疗产品抗肿瘤功能的增强或减弱相关联，可用于监测和改进 T 细胞疗法的设计和开发。